Sistemul de cromatograf lichid de înaltă performanță (HPLC) este o ramură importantă a cromatografiei și este o tehnologie indispensabilă de separare și analiză în domeniile chimiei moderne, medicinei, industriei, agriculturii, inspecției mărfurilor și inspecției judiciare. Utilizează lichid ca fază mobilă și folosește un sistem de infuzie de înaltă presiune pentru a pompa un singur solvent cu polarități diferite sau amestecați solvenți, tampoane etc. într-o coloană cromatografică echipată cu fază staționară de înaltă eficiență. După ce componentele din coloană sunt separate, acestea intră în detector pentru detectare, realizând astfel o analiză eficientă, rapidă și sensibilă a probei.
Componente structurale
Sistemul de cromatografie lichidă de înaltă performanță include în principal rezervoare de stocare a lichidelor, pompe de perfuzie de înaltă presiune, probe, coloane cromatografice, detectoare, înregistratoare și dispozitive de procesare a datelor. Printre acestea, pompa de perfuzie de înaltă presiune este una dintre componentele de bază ale întregului sistem, care este responsabilă pentru trimiterea fazei mobile în coloana cromatografică cu presiune și debit stabil. Coloana cromatografică este o componentă cheie a separării, umplută cu o fază staționară cu particule extrem de fine. Coeficienții de partiție a diferiților compuși între faza staționară și faza mobilă sunt diferiți, realizând astfel separarea. Detectorul convertește componentele separate în semnale electrice și emite graficul și rezultatele prin înregistrator și dispozitiv de procesare a datelor.
Cum funcționează
Principiul de funcționare al sistemului de cromatografie lichidă de înaltă performanță se bazează pe principiul de separare al cromatografiei, adică atunci când fiecare componentă dizolvată în faza mobilă trece prin faza staționară, are dimensiuni și forțe diferite ale interacțiunii cu faza staționară (adsorbție, distribuție, excludere și afinitate), iar timpul de rezidență în faza staționară este diferit, deci după ce faza staționară este diferită. Mai exact, pompa de înaltă presiune pătrunde în faza mobilă din rezervorul de stocare a lichidului în sistem, iar soluția de probă intră în faza mobilă prin injector și este încărcată în coloana cromatografică pe măsură ce faza mobilă curge. Deoarece coeficienții de distribuție ai componentelor din soluția de probă sunt diferiți în faza mobilă și faza staționară, atunci când cele două faze sunt deplasate una față de cealaltă, după un proces de distribuție continuu de adsorbție-desorbție, distanța dintre componentele amestecate este deschisă treptat și în cele din urmă curge din coloană în secvență ca componente individuale separate. Detectorul convertește concentrația probei într-un semnal electric și îl transmite înregistratorului pentru a tipări datele eșantionului sub forma unui grafic.
Avantaje și aplicații
Sistemul de cromatografie lichidă de înaltă performanță are caracteristicile unei eficiențe ridicate de separare, viteză rapidă de analiză, sensibilitate bună la detecție și capacitatea de a analiza și separa substanțele active fiziologic instabile termic, cu puncte de fierbere ridicate și nu pot fi vaporizate. Domeniul său de aplicare este larg și aproape nu este limitat de volatilitatea și stabilitatea termică a obiectelor analitice. Aproape toți compușii, inclusiv punctul de fierbere ridicat, polaritatea, compușii ionici și substanțele macromoleculare, pot fi analizați și determinați prin cromatografie lichidă de înaltă performanță. În domeniul farmaciei, medicinei tradiționale chineze și medicinei tradiționale chineze, științei și tehnologiei alimentelor, sistemele de cromatografie lichidă de înaltă performanță sunt utilizate pe scară largă în analiza medicamentelor, cercetarea amprentelor din medicina chineză, detectarea reziduurilor de pesticide, analiza componentelor nutriționale alimentare etc.
Tendințe de dezvoltare
Odată cu dezvoltarea rapidă a biotehnologiei moderne și a industriei farmaceutice, sistemele de cromatografie lichidă de înaltă performanță se dezvoltă și se îmbunătățesc constant. Tendința actuală de dezvoltare este de a se înclina către analiza și prepararea biochimice și de medicamente și de a dezvolta metode de separare și analiză mai eficiente, sensibile și rapide. În același timp, ca răspuns la problemele de consum ridicat și toxicitate a fazelor mobile, alternative ecologice și durabile sunt, de asemenea, explorate în mod activ.
Pentru a rezuma, sistemele de cromatografie lichidă de înaltă performanță joacă un rol din ce în ce mai important în domeniul științei și tehnologiei moderne, cu capacitățile lor unice de separare și analiză și perspective largi de aplicare.
